Доклад на тему: "Взаимодействие вирус-хозяин на примере энцефалитов животных"

 Острое трансмиссивное антропозоонозное нейроинфекционное заболевание. Характеризуется лихорадкой, синдромом общей инфекционной интоксикации, поражением центральной нервной системы, иногда развитием очаговой пневмонии.Возбудитель — Venezuelan equine encephalitis virus относится к роду Alfavirus семейству Togaviridae и обладает общими для альфавирусов свойствами.(http://www.infectology.ru/nosology/infectious/viral/venesuel.aspx )В естественных условиях болеют, как правило, лошади в возрасте от 2 до 12 лет. Чаще заболевают лошади при пастбищном содержании. Болезнь встречается в виде небольших вспышек или спорадич. Случаев. Источник возбудителя инфекции — больные лошади. Переносчиками болезни могут быть нек-рые виды комаров и клещей. Первые случаи болезни, в зависимости от концентрации насекомых-гематофагов в природе, регистрируются позднейВесной (в мае), наибольшая заболеваемость наблюдается в сентябре.Инкубационный период от 15 до 40 сут. Течение острое. Болезнь проявляется в осн. В буйной и тихой формах, реже встречается бессимптомная (латентная) форма. Продромальная стадия болезни продолжается от неск. Часов до 3—5 сут. Характеризуется кратковременным подъёмом темп-ры тела, угнетением, утомляемостью, снижением аппетита, зевотой, понижением кожной чувствительности, слабой желтушностью. При буйной форме лошади срываются с привязи, безудержно стремятся вперёд, реже назад, натыкаются на препятствия, наносят себе раны и ушибы.Среди лошадей смертность достигает 50 % инфицированных животных, что сказывается на сельском хозяйстве многих стран Латинской Америки.Вспышки ВЭЛ появляются периодически в результате мутации энзоотических подтипов вируса [14].Подтипы ID, IE, IF и II–VI являются энзоотическими, включают авирулентные для лошадей штаммы, которые, несмотря на то, что они могут вызывать заболевания людей (даже с летальным исходом), не ассоциированы с большими эпидемическими вспышками. Энзоотические штаммы подтипов ID и IЕ антигенно и генетически являющиеся близкородственными друг другу и подтипам IАВ и IC, циркулируют в низменных тропических лесах и болотах среди мелких млекопитающих.86487011049000Вирионы имеют спиральный тип симметрии.Рибонуклеопротеид представляет собой тяж толщиной 1,5-1,7 нм. Предполагается, что он упакован внутри вириона таким образом, что петли наружной части нуклеоида взаимодействуют друг с другом, как капсомеры при кубическом типе симметрии. Это и определяет квазиикосаэдрическую форму нуклеоида.(https://myzooplanet.ru/mikrobiologiya-immunologiya-veterinarnaya/venesuelskiy-entsefalomielit-loshadey-10406.html)Впервые вирус выделили из мозга лошадей Вир и Виков (1938 г.) в Венесуэле.028638500Схема и этапы репродукции вируса. ( http://humbio.ru/humbio/infect_har/000ecfbc.htm )Адсорбция на мембране клетки;Проникновение в клетку;Депротеинизация;Синтез компонентов вирусов;Формирование дочерних вирионов;Выход вирионов[2].Адсорбция на мембране клеткиАдсорбция вириона на мембране клетки идет по пути взаимодействия вирусного белка (антирецептора) с клеточными рецепторами. Для каждого вируса на клеточной мембране существуют специфические рецепторы, с которым он и связывается. По химической природе рецепторы, фиксирующие вирус, могут являться мукопротеиновыми либо липопротеиновыми. Распознавание клеточных рецепторов осуществляют капсидные или суперкапсидные белки вириона[2].Антирецепторы вирионов являются прикрепительными белками. Они могут иметь форму шипов, нитей, грибовидных структур[2].В самом процессе адсорбции большую роль играют электрические заряды. Вирусы обычно отрицательно заражены, а участки клеточной стенки – положительно[2].Процесс адсорбции занимает от пяти до девяноста минут. Количество специфических рецепторов на поверхности одной клетки 104 –105[2].381029146500После проникновения в клетку РНК транслируется с образованием неструктурных белков, необходимых для амплификации геномной РНК и последующего синтеза субгеном- ной 26S РНК, которая является матричной для синтеза структурных белков.Апатогенные клоны образуют в тканевой культуре мелкие бляшки, патогенные — более крупные. При введении мышам они размножаются в печени и селезенке, симптомы болезни не проявляются. Популяция вируса неоднородна, так как, помимо апа-тогенного, обнаруживаются патогенные клоны вируса. При серийном пассировании на мышах вирулентность аттенуированных вариантов восстанавливается.В инфицированных клетках образуются псевдовирусы, представляющие собой комплекс вирусной РНК с клеточным белком, что играет важную роль в возникновении и поддержании вирусоносительства. Будучи нечувствительными к вирусспеци-фическим AT и обладая инфекционностью, псевдовирусы легко преодолевают иммунные барьеры организма и долго персистируют в клетках.Вирионы формируются, по-видимому, на мембранах, окружающих цитоплазмен-ные вакуоли, затем достигают поверхности клетки и выделяются из нее. Каждая клетка продуцирует приблизительно 2700 бляшкообразующих единиц. При культивировании в культуре фибробластов КЭ зрелые вирионы формируются на мембранах внутриклеточных вакуолей. Найдены олиго – и полигеномные формы вирионов. Вирус ВЭЛ инкорпорирует в своей структуре АГ клеток, в которых он репродуцируется. У высокоочищенного вируса, выращенного в культуре куриных фибробластов, найдены видоспецифический АГ, гетерогенный АГ Форссмана и групповые АГ А и Н. Эти АГ локализованы у вируса неодинаково: видовой — поверхностно, групповые и гетерогенный АГ Форссмана — более глубоко. Изучен процесс прикрепления вирионов аттенуированного шт. ТС-83 вируса ВЭЛ к макрофагоподобным клеткам липомы BW-J-M. Показана специфическая природа гликопротеидных рецепторов клеток, ответственных за прикрепление вируса.Антигенная структура и вариабельность.Вирусы комплекса ВЭЛ в АГ-отношении разделены на 4 группы или подтипами: 1-я группа содержит 7 вариантов, из них 4 высокой вирулентности; остальные 3 группы имеют по одному варианту с низкой вирулентностью. Вирус ВЭЛ дает перекрестные реакции с другими альфавирусами в РЗГА. Его можно легко дифференцировать от других вирусов с помощью РСК и PH. На основании опытов перекрестной резистентности иммунизированных животных выявлена близость вируса ВЭЛ к варианту вируса ВАЭЛ. Вирус разделяют на подтипы по спектру патогенности: вирулентный для хомяков шт. ВеА8 (подтип 3), не вирулентный для хомяков шт. ВеА35645 (подтип 4), вирулентный шт. 63И2 (подтип 1), аттенуированный ТС83 вакцинный шт. (подтип 1, вариант А) нестабильный по патогенности для хомяков. Вирус ВЭЛ с 1930-1940 гг. изменил свои свойства, поэтому для изготовления инактивированной вакцины используют вновь выделенные эпизоотические штаммы.С помощью иммуноэлектрофоретического фракционирования АГ вируса ВЭЛ удалось выделить две фракции: 1 включает поверхностные мембранные АГ, идентичные ГА; 2 содержит гемолизирующий АГ.АГ-структура определяется поверхностными гликопротеидами Е1 и Е2. Вирусы комплекса ВЭЛ в АГ-отношении разделены на четыре группы или подтипами: первая группа содержит семь вариантов, из них четыре высокой вирулентности; остальные три группы имеют по одному варианту с низкой вирулентностью. ( https://veterinarua.ru/virusnye-infektsii/1225-venesuelskij-entsefalomielit-loshadej.html ) Подтипы с IА по IЕ, II (Болотистая местность), III (Мукамбо) и IV (Пиксуна). Свойства ВЭЛ и особенности культивирования.Вирус ВЭЛ легко размножается на КЭ, в культуре клеток почки некоторых приматов, фибробластов КЭ, почки морской свинки и хомячков, уток, обезьян, овец, перевиваемых клеток L (мышиных). Размножаясь в диплоидных клетках человека (W1-38), он вызывает ЦПИ. В культуре клеток L развивается хроническая инфекция. В культуре клеток КЭ, HeLa и клеток сердца морской свинки вирус аттенуируется настолько, что становится авирулентным для морских свинок, кроликов и взрослых мышей, зараженных периферически.Аттенуированный вакцинный штамм вируса ТС-83 получен в результате 45 пассажей вирулентного штамма в культуре клеток сердца морской свинки (16, 17, 21). Аналогичный штамм-15 получен серийным пассированием в культуре клеток КЭ (11).Этапы органного патогенеза.( https://yandex.ru/turbo/lektsia.com/s/9x377f.html )Механизм заражения — кровяной трансмиссивный, реализуемый при кровососании комаров. В энзоотической циркуляции вируса между животными основную роль играют комары Culex spp. (подрод Melanoconion).Источник: https://meduniver.com/Medical/Microbiology/1535.html MedUniverВирус проникает в организм человека через поврежденную кожу или слизистую оболочку дыхательных путей. После укуса комара возбудители попадают в лимфу или через поврежденные кожные сосуды — в кровь. В период вирусемии они достигают нервной системы, вызывая в нервных клетках дегенеративные изменения. Вирусемия продолжается в среднем до 5 дней. Одновременно поражаются другие внутренние органы, в том числе клетки поджелудочной железы. Восприимчивы к заболеванию все возрастные группы людей. Перенесенное заболевание оставляет прочный иммунитет. Патологоанатомическая картина характеризуется изменениями в центральной нервной системе, свойственными энцефалитам.Факторы противовирусного специфического и неспецифического иммунитетаСтруктурные гликопротеиды вируса ВЭЛ играют важную роль в формировании противовирусного иммунитета, вызывая появление нейтрализующих анти-ГА и про-тективных AT. У переболевших животных обнаружены ВНА, КСА и анти-ГА. ВНА появляются на 6-й день после заражения, КСА и анти-ГА — позже. У КРС появляются ВНА и анти-ГА. Сыворотки, полученные на компоненты суперкапсида, защищают мышей от летальной вирусной инфекции. Иммунизация мышей суперкапсидом сообщает им иммунитет против вирулентного вируса. Обсуждается перспектива использования компонентов суперкапсида вируса в качестве вакцины. Показана возможность выявления AT к ВЭЛ в ELISA с применением очищенного в водно-полимерной системе АГ.С помощью мо- нАТ к вирусным гликопротеидам Е1 и Е2 была изучена их полная АГ-структура, выявлены и картированы эпитопы, определены функции отдельных АГ-детерминант (22), впервые предложена карта взаимного пространственного расположения эпитопов на гликопротеиде У2 вируса ВЭЛ и выявлен “критический сайт”, ответственный за формирование ВНА и протективных АТ (18, 22). В результате было установлено, что белок Е1 вируса ВЭЛ содержит не 1, как это было известно ранее, а по крайней мере 2 протективных эпитопа (12).Этапы лабораторной диагностики. ( https://meduniver.com/Medical/Microbiology/1536.html )Диагноз ставят на основании выделения и идентификации вируса, серологических исследований и патологоанатомических изменений. Наиболее типичны изменения в легочных дольках (микрозернистый желто-буроватый пигмент и дистрофические изменения типа зернистого и жирового перерождения). Головной мозг для биопробы берут не позже 6 ч после смерти животного. Для повышения концентрации вирус 1-кратно пассируют на 7-8-дн КЭ.Из серологических реакций применяют РСК на холоде и PH. Специфические сыворотки получают на кроликах. АГ готовят путем многократного замораживания (до -70°С) и оттаивания вируссодержащей ткани мозга или обработкой фреоном-113. Типирование вируса проводят перекрестным заражением иммунизированных лабораторных животных или в PH. Разработан точный, высокочувствительный тест выявления АТ к вирусу в PH при участии анти-у-глобулиновой сыворотки. Показано, что чувствительность этого теста в сотни раз превышает чувствительность обычной PH. Результат PH с анти-у-глобулиновой сывороткой учитывают через 24 ч. Также рекомендована гибридизация с олигонуклеотидами как быстрый способ идентификации вируса ВЭЛ (10). Разработан непрямой ИФА для обнаружения АГ вируса ВЭЛ. Он специфичен как и прямой ИФА, но чувствительнее его в 4 раза (5, 6).80137062611000У больных лошадей вирус выделяется со слизью носа, секретами глаз, слюной, мочой и молоком, поэтому возможен контактный путь распространения болезни. У экспериментально зараженных лошадей вирус обнаруживают в носовых, ротовых и конъюнктивальных смывах, в крови, почках, мозге. В отличие от ЗАЭЛ и ВАЭЛ при ВЭЛ вирус обнаруживают в крови животных в высоком титре, что способствует инфицированию большого числа москитов, питающихся кровью больных животных.При вскрытии черепной полости устанавливают незначительное помутнение мозговых оболочек, резкую инъекцию кровеносных сосудов в полушариях. Нервная ткань отечна и пастообразна, в боковых желудочках и спинномозговом канале большое количество слегка опалесцирующего, бесцветного экссудата, сосудистые сплетения отечны. Патогистологические изменения в печени — печеночные клетки деструктированы, в состоянии зернистого жирового перерождения или распада. Разрушенная ткань замещается расширенными кровеносными капиллярами и инфильтратами из лимфоидных, лейкоцитарных и гистиоцитарных клеток. Одновременно с дегенеративными формами обнаруживают крупные регенированные двух- или многоядерные клетки, в ретикулярных клетках большое количество билирубина. Строма печени разросшаяся. Селезенка не изменена, в почках застойные явления. В головном мозге и его оболочках, а также в спинном мозге обнаруживают гиперемию, периваскулярный отек и кровоизлияния, резко выражены дистрофические изменения ганглиозных клеток (хроматолиз и вакуолизация нейроплазмы), местами пролиферация глии. В ганглиозных клетках коры, аммонова рога, в клетках Пуркинье мозжечка, продолговатого мозга иногда встречаются цитоплазматические ацидофильные тельца-включения.( https://www.google.com/url?sa=t&source=web&rct=j&url=https://studfile.net/preview/3893982/page:93/&ved=2ahUKEwjmkYPMoM3tAhXysYsKHfnCCowQFjAAegQIARAB&usg=AOvVaw1C82SN-c9h5-ompiX6WwTG )31242040259000Дифференциальный диагноз. Необходимо исключить бешенство, болезнь Ауески, ботулизм, пироплазмидозы и кормовые отравления, а также борнаской болезни, японского и американского энцефаломиелитов лошадей. Бешенство от ИЭМЛ отличается тем, что к нему восприимчивы все виды сельскохозяйственных и лабораторных животных; инфицирование совершается через укус. Бешенство у лошадей протекает в виде спорадических случаев, больные лошади агрессивны, отсутствует желтуха, при патогистологическом исследовании выявляют тельца Бабеша-Негри. Очень высокая летальность-до 100%. Болезнь Ауески у лошадей наблюдается сравнительно редко. Отличается она от ИЭМЛ исключительно острым и быстрым течением со 100%-ной летальностью. Для этой болезни характерен резко выраженный зуд (место ворот инфекции), побуждающий лошадь расчесывать и даже разгрызать зудящее место. Желтуха отсутствует. При ботулизме возникает паралич мышц глотко-гортани, отвисает нижняя челюсть, рефлексы сохранены, отсутствует желтуха, буйство. Наблюдается обильное слюнотечение. При пироплазмозах в крови обнаруживают паразитов, применение химиотерапевтических средств дает лечебный эффект. 381028956000 Специфическая профилактика.Вакцина.( https://findpatent.ru/patent/203/2035191.html )Животные-реконвалесценты приобретают иммунитет, продолжительность которого не изучена. В США и странах Латинской Америки для профилактики ВЭЛ применяют аттенуированную живую вакцину ( из шт. ТС-83), которая защищает лошадей и ослов против вирулентного штамма в течение 14 месяцев. Однократная иммунизация поверхностными гликопротеинами вируса защищала 70 % мышей от летальной инфекции вирулентным штаммом, а двукратная иммунизация обеспечивала 100 % защиту от заражения. В крови вакцинированных животных появляются КС и анти-ГА, динамика титра и продолжительность циркуляции которых не изучены. Помимо того, зарубежными исследователями на основе вирулентного шт. Тринидад получены аттенуированные штаммы линии ТС-82, получившие широкое применение в ветеринарной практике, но не нашедшие применения в медицинской практике из-за высокой реактогенности.Инактивированную вакцину готовят из шт. Guajira, культивируемого в клетках ВНК. Введение инактивированной вакцины ТС-84 после живой ТС-83 оказывало хороший бустерный эффект.Неспецифическая профилактика.Профилактические мероприятия направлены на повышение устойчивости организма полноценным кормлением, хорошими условиями содержания и нормальным использованием лошадей. Животных обрабатывают инсектицидами, переводят на стойловое содержание. Осушают заболоченные участки, расчищают кустарники.При установлении диагноза хозяйство объявляют неблагополучным и накладывают карантин. Всех лошадей обследуют клинически, уделяя особое внимание видимым слизистым оболочкам, температуре тела. Больных и подозрительных по заболеванию лошадей изолируют и лечат.Выздоровевших лошадей на месяц освобождают от работы. Навоз обеззараживают биотермическим методом.Карантин снимают через 40 дней со дня последнего случая выздоровления или падежа больных животных и после проведения заключительной дезинфекции.