Стафилококковый бактериофаг

ВведениеАктуальность темы исследования. Бактерии, резистентные к большинству или ко всем из всех известных антибиотиков, вызывают все более серьезные проблемы. Это увеличивает риск возврата медицинского сообщества к проблемам того периода, когда антибиотики были неизвестны и широко распространены неизлечимые инфекции и эпидемии. Несмотря на интенсивную работу ведущих химиков и фармацевтов всего мира, за последние 30 лет резко снизился синтез новых классов антибиотиков, и в ближайшее время не предвидится поступления в клиническую практику принципиально новых представителей антибактериальных средств. Есть надежда, что вновь обнаруженная возможность полностью секвенировать микробные геномы и определять молекулярные основы патогенности откроет новые пути лечения инфекционных заболеваний, но все с большим рвением идет поиск других подходов к этой проблеме. Одним из результатов такого поиска является вновь возникший интерес к возможностям терапевтического использования бактериофагов – специфических вирусов, которые атакуют только бактерии и убивают патогенные микроорганизмы. Бактериофаги обладают способностью проникать в бактериальные клетки, репродуцироваться в них и вызывать их лизис.Они широко используются с лечебной, в т. ч. в хирургической практике, особенно при лекарственно-устойчивых формах инфекций, и профилактической целью в регионах, эндемичных по инфекционным заболеваниям, а также в организованных коллективах, таких как ясли, детские сады, школы и армейские казармы, где могут происходить быстрые вспышки инфекций. В современных отечественных и зарубежных литературных источниках достаточно подробно освещены клинические исследования, направленные на профилактику и лечение ОКИ бактериофаговыми препаратами. В то же время в тени остались многочисленные клинические исследования, посвященные применению фагов в профилактике и лечении гнойно-септических осложнений в хирургии, в т. ч. для купирования часто возникающих патологических состояний органов дыхания.Стафилококковый бактериофаг является препаратом, который применяется для лечения фурункулов, карбункулов, гидроаденитов, абсцессов, гнойно-осложненных ран, инфицированных стафилококками, гнойных ангин, бронхитов, плевритов, бурситов, термических ожогов, хронических остеомиелитов, флегмон, тендовагинитов, маститов, циститов, холециститов. Однако, несмотря на широкий спектр показаний к применению и широкомасштабный эффект, данный препарат отошел на второй план, уступив место современным группам антибиотиков. Объектом исследования в курсовой является стафилококковый бактериофаг.Предметом исследования – современные возможности стафилококкового бактериофага.Целью в курсовой работе является изучение теоретическое изучение фармакологических свойств стафилококкового бактериофага.На основании цели, в курсовой работе поставлены следующие задачи:Рассмотреть историю развития учения о бактериофагах;Изучить классификацию, строение и состав бактериофагов;Дать общее описание стафилококкового бактериофага.Структура работы включает в себя введение, две главы, заключение и список использованной литературы. Глава 1. Теоретические основы изучения бактериофагаИстория развития учения о бактериофагахОткрытие вирусов бактерий было подготовлено развитием микробиологии в конце XIX в. Идеи JI. Пастера о бактериальной этиологии инфекций, разработанные в 80-х годах методы культивирования бактерий на плотных и жидких питательных средах, утверждение в микробиологии идей мономорфизма – все это способствовало изучению морфологических и физиологических особенностей бактерий. Среди других феноменов роста бактерий было описано явление их спонтанного лизиса. Впервые спонтанное растворение бактериальной культуры было обнаружено в 1892 г. В. Крузе и С. Пансини при изучении роста пневмококка. Спустя четыре года русский бактериолог М. Ганкин (1896) сообщил о бактерицидном действии воды Джамны и Ганга в Индии на холерный вибрион. Автор обнаружил сохранение бактерицидных свойств воды этих рек после ее пропускания через бактериальный фильтр. Лизис бактерий (возбудителя сибирской язвы) под влиянием перевиваемого агента описал в 1898 г. Н. Ф. Гамалея, назвавший это явление бактериолизом. Открытие вирусов, паразитирующих на бактериях, принадлежит английскому микробиологу Фредерику Уильяму Туорту и франкоканадскому исследователю Феликсу д’Эреллю. Английский бактериолог Фредерик Туорт в статье 1915 года описал инфекционную болезнь стафилококков, инфицирующий агент проходил через фильтры, и его можно было переносить от одной колонии к другой. Независимо от Ф. Туорта микробиолог Феликс д’Эрелль 3 сентября 1917 года сообщил об открытии бактериофагов, ввел термин «бактериофаг».После открытия явлений бактериофагии д’Эрелль развил учение о том, что бактериофаги патогенных бактерий, являясь их паразитами, играют большую роль в патогенезе инфекций, обеспечивая выздоровление больного организма, а затем создания специфического иммунитета. Идея о паразитарной природе фага, о возможности его применения для лечения и профилактики инфекционных болезней привлекла к бактериофагу внимание микробиологов всего мира. Наряду с исследованиями, направленными на практическое использование бактериофага, проводились работы по выяснению его природы. Особенно упорно изучал свойства бактериофага Ф. д’Эрелль. Он описал два способа определения числа частиц бактериофага: путем лизиса бульонных культур бактерий при внесении прогрессивно уменьшающихся концентраций бактериофага, вплоть до разведения лизата, когда вносятся единичные частицы фага («конечное разведение»), и по числу образуемых «стерильных» пятен при посеве разведения лизата на бактериальный газон на плотной питательной среде (метод «стерильных» пятен). Этот второй метод в модификации А. Грациа широко применяется и сейчас. Изучая взаимодействие бактериофага и бактерий, д’Эрелль отметил ряд этапов в этом процессе: прикрепление фага к поверхности клетки, внедрение его внутрь клетки и размножение в ней, завершающееся лизисом клетки и выходом из нее 15–25 частиц бактериофага. Ему удалось наблюдать в темном поле микроскопа лизис бактериальной клетки и появление 15–25 мельчайших «блестящих» точек. Число их точно соответствовало количеству стерильных пятен, образуемых при высеве лизата на бактериальный газон. На основании этого д’Эрелль сделал верный вывод, что эти «блестящие» точки являются частицами бактериофага. Он привел также ряд других доказательств корпускулярности бактериофага: способность его проходить через бактериальные фильтры определенной пористости, осаждение в жидкости при длительном стоянии и др. д’Эрелль отметил изменчивость бактериофага (объясняя это способностью фага к адаптации), а также автономность антигенного состава фага. Однако, д’Эрелль считал, что существует только один вид бактериофага – Bacteriophag umintestinale, являющийся внутриклеточным паразитом бактерий. Первая эра исследования бактериофагов продолжалась с 30-х по 50-е гг. XX в. и привела к большому количеству фундаментальных открытий, таких как доказательство генетической роли ДНК, расшифровка генетического кода и открытие посреднической роли РНК. Все эти достижения привели к рождению прогрессивной научной дисциплины – молекулярной биологии. Вторая эра наступила в 80–90-е гг. прошлого века, когда фаги и полученные из них продукты оказали важнейшее влияние на развитие биотехнологий. Технология рекомбинантной ДНК, например, была развита на основе бактериофагов как первичных векторов или частей векторов (промоторы для экспрессионных векторов, упаковочные сигналы для космид и фагмид, сигналы встройки для интеграционных векторов, репликоны для фагмид и т. д.). Более того, бактериофаги стали источником открытия и получения большого количества ферментов, включая интегразы, ДНК-лигазы, ДНК-полимеразы, РНК-полимеразы, рекомбиназы, белки, связывающие одноцепочечную ДНК (SSB), эндо- и экзонуклеазы, метилазы и эндонуклеазы рестрикции, которые сейчас используются в каждой молекулярно-биологической лаборатории. Интерес к бактериофагам не был постоянно на высоком уровне. В 70- е гг. начался спад публикационной активности, связанной с этим биологическим объектом, из-за недостатка финансирования и переключения исследователей на более перспективное изучение эукариотических систем. В настоящее время возросло число исследований бактериофагов и их практического использования. Есть несколько причин такого подъема. Во-первых, в результате секвенирования бактериальных геномов было выяснено, что большинство бактерий являются лизогенными хотя бы по одному фагу, а также что фаги сыграли важнейшую роль в эволюции генома хозяина. Во-вторых, экологи обнаружили, что количество фаговых частиц в почве и воде в десятки, сотни раз превышает их количество в бактериальных клетках. Таким образом, признана роль фагов во влиянии на популяционную динамику и эволюцию бактерий, а также в поддержании природных биогеохимических циклов, таких как круговорот углерода. Более того, недавние геномные и транскриптомные исследования продемонстрировали высокую степень метаболической взаимосвязи фагов и их хозяев. Например, бактериофаги цианобактерий имеют ДНК, кодирующую, кроме всего прочего, ключевой ген фотосинтеза. В-третьих, фаги являются достойной альтернативой антибиотикам, ко многим из которых у болезнетворных бактерий все чаще обнаруживается устойчивость, а химическое разнообразие антибиотиков давно исчерпано.Строение и состав бактериофаговБактериофаги (фаг, от греч. phagos – пожирающий) – группа вирусов, паразитирующих на бактериях. Бактериофаги широко распространены в природе и обнаруживаются в воде, почве, сточных водах, организме человека и животных, а также в культурах бактерий. Бактериофаги различаются по химической структуре, типу нуклеиновой кислоты, строению фаговой частицы, морфологии негативных колоний, характеру взаимодействия с микробной клеткой. Для обозначения бактериофагов используют буквы латинского и греческого алфавитов, например, к хорошо изученным фагам кишечной палочки относятся фаги λ, ϕX174, fd, f2, R17, Т2. Как и все вирусы, во внеклеточной форме бактериофаги представляют собой метаболические инертные частицы. Большинство из них имеют хорошо сформированную икосаэдрическую головку и хвост различной выраженности иногда с дополнительными структурами, опосредующими адсорбцию фага на бактериальной клетке (рис. 1). Типичная фаговая частица (вирион) состоит из головки и отростка (хвоста). Размеры фагов достигают 20–200 нм. Средний диаметр головки составляет 60–100 нм, длина отростка 100–200 нм. Длина хвоста обычно в 2–4 раза больше диаметра головки. В головке содержится генетический материал – одноцепоечная или двуцепочечная РНК или ДНК с ферментом транскриптазой в неактивном состоянии, окружённая белковой оболочкой – капсидом. Нуклеиновая кислота и капсид вместе составляют нуклеокапсид. Хвост, или отросток, представляет собой белковую трубку – продолжение белковой оболочки головки, в основании хвоста имеется АТФ-аза, которая регенерирует энергию для инъекции генетического материала. Отросток имеет вид полой трубки, окружённой чехлом, содержащим сократительные белки. У ряда вирусов чехол способен сокращаться, обнажая часть стержня. На конце отростка у многих бактериофагов имеется базальная пластинка, от которой отходят тонкие длинные нити, способствующие прикреплению фага к бактерии (рис. 1)Рис. 1. Строение фаговой частицы (на примере Т-четного бактериофага): 1 – головка, 2 – хвост, 3 – нуклеиновая кислота, 4 – капсид, 5 – «воротничок», 6 – белковый сократительный чехол вокруг полого стержня хвоста, 7 – фибриллы (нити) хвостового отростка, 8 – шипы, 9 – базальная пластинка Наиболее изучены Т-фаги (англ. type – типовые). Они составляют Тгруппу коли-дизентерийных фагов, включающую представителей: 4 нечетных Т1, ТЗ, Т5 и Т7 и 3 четных Т2, Т4, Т6. Классические, так называемые «хвостатые» фаги, составляют основную массу бактериофагов (96 %).Применение современных электронных микроскопов, а также усовершенствование методов приготовления препаратов для электронной микроскопии позволили более детально изучить тонкую структуру фагов. Оказалось, что она весьма разнообразна и у многих фагов более сложна, чем структура вирусов растений и ряда вирусов человека и животных. В настоящее время существует большое количество фагов с морфологией, отличной от классической (рис. 2, 3; табл. 1). Фаги отличаются друг от друга по форме, величине, сложности организации, по химическому составу вирусной частицы. Известно, что фаги, лизирующие микроорганизмы различных групп, могут быть идентичными по своей морфологии. В то же время фаги, активные против одной и той же культуры бактерий, могут резко различаться по своей структуре. Так, среди фагов, способных лизировать разные штаммы кишечной палочки, выявлены все известные морфологические типы фагов. По форме вирусных частиц фаги делятся на шесть основных морфологических типов (групп) (рис. 2, табл. 1)Рис. 2. Морфологические типы (группы) бактериофаговРазнообразие геномов бактериофагов весьма велико: объемы геномов колеблются от 20 до почти 700 kb, хотя длина большинства фаговых геномов составляет около 50 kb. Самый крупный представитель – бактериофаг G. Его геном длиной в 670 kb является одним из лидеров среди всех вирусных геномов, превышая в 4 раза самый маленький бактериальный геном.Большинство изученных фагов имеют двухцепочечную ДНК (λ, Т4, Mu, P-фаги и др.), но существуют группы фагов с одноцепочечной ДНК (φX174, нитчатые бактериофаги), двух- и одноцепочечной РНК (φ6, MS2). Бактериофаги, как и другие вирусы, состоят из нуклеиновой кислоты и белка. Общее количество белка в частице фага составляет 50–60%, нуклеиновых кислот – 40–50%. В химическом составе некоторых фагов обнаружены ДНК с необычными азотистыми основаниями. У фага Т2 вместо цитозина содержится 5-оксиметилцитозин, внутри головки фага обнаружен белок, в состав которого входят полиамины (спермин, путресцин). Этот белок играет определенную роль в суперспирализации фаговой ДНК, что способствует ее размещению в сравнительно небольшой головке. В частицах многих фагов под чехлом дистальной части отростка содержится фермент лизоцим.Рис. 3. Морфология представителей различных семейств бактериофаговФаги более устойчивы к действию физических и химических факторов окружающей среды, чем многие вирусы человека. Большинство из них инактивируются при температуре свыше 65–70 °С, хорошо переносят замораживание и длительно сохраняются при низких температурах и высушивании. Сулема (0,5 % раствор), фенол (1,0 % раствор) не оказывают на них инактивирующего действия. В то же время, 1,0 % раствор формалина инактивирует фаговые частицы в течение нескольких минут. 1.3 Классификация бактериофаговВирусы бактерий объединены в класс Bacteriophagae. При классификации бактериофагов учитывают морфологию фаговых частиц, спектр действия, физико-химический состав, антигенную структуру и другие свойства. В настоящее время согласно Международной классификации и номенклатуре вирусов в зависимости от типа нуклеиновой кислоты бактериофаги подразделяются на ДНК- и РНКсодержащие. Большинство фагов относится к ДНК-содержащим вирусам с нуклеокапсидом, организованным по принципу смешанной симметрии. В состав бактериофагов может входить как одноцепочечные, так и двуцепочечные молекулы ДНК или РНК. По морфологии фаговых частиц и типу нуклеиновой кислоты бактериофаги распределены на семейства (таблица 2).Таблица 2 – Семейства бактериофаговПо форме бактериофаги подразделяются на следующие морфологические группы или типы (рисунок 4): - нитевидные фаги; - мелкие фаги без отростка; - кубические фаги с аналогом (рудиментом) отростка; - фаги с коротким отростком (хвостом); - фаги с длинным отростком и несокращающимся чехлом; - фаги с длинным отростком и сокращающимся чехлом.Рисунок 8 – Распределение бактериофагов на морфологические типыКаждый бактериофаг вызывает лизис (растворение) определенного вида бактерий. Поэтому бактериофаги обозначают буквами латинского или русского алфавита с цифровым индексом, перед которыми указывают название вида бактерий (например, фаги E. coli Т2). Фаги, лизирующие дизентерийные бактерии, называются дизентерийными бактериофагами, лизирующие сальмонеллы - сальмонеллезными бактериофагами, лизирующие дифтерийные бактерии - дифтерийными бактериофагами и т. д.Бактериофаги не способны инфицировать эукариотические клетки. По спектру литического действия выделяют следующие группы бактериофагов:типовые (типоспецифические) бактериофаги (Т-фаги) взаимодействуют с отдельными типами (вариантами) бактерий внутри одного вида; моновалентные бактериофаги (монофаги) взаимодействуют с бактериями одного вида; поливалентные бактериофаги (полифаги) взаимодействуют с бактериями нескольких родственных видов. По механизму взаимодействия с клетками бактериофаги подразделяются на вирулентные и умеренные. Вирулентные бактериофаги (литические бактериофаги) проникают в бактерии, размножаются в них и выходят из бактериальной клетки, вызывая ее лизис. Умеренные бактериофаги после проникновения в клетку встраивают свою нуклеиновую кислоту в геном бактерии и не вызывают ее лизиса.Глава 2. Общее описание стафилококкового бактериофага2.1 Общие сведения о препаратеРусское название - Бактериофаг стафилококковыйАнглийское название - Bacteriophagum StaphylococcumЛатинское название вещества Бактериофаг стафилококковый - Bacteriophagum staphylococcum (род. Bacteriophagi staphylococci)Фармакологическая группа вещества: Бактериофаг стафилококковыйВакцины, сыворотки, фаги и анатоксиныТиповая клинико-фармакологическая статья 1Фармдействие. Обладает способностью специфически лизировать стафилококковые бактерии.Показания: Гнойно-воспалительные заболевания ЛОР-органов, дыхательных путей, легких (синусит, отит, ангина, фарингит, ларингит, трахеит, бронхит, пневмония, плеврит) и ЖКТ (гастроэнтероколит, холецистит, дисбактериоз кишечника); Хирургические инфекции (гнойные раны, ожог, мастит, абсцесс, флегмона, карбункул, гидраденит, панариций, парапроктит, бурсит, остеомиелит); Урогенитальные инфекции (уретрит, цистит, пиелонефрит, кольпит, эндометрит, сальпингооофорит);Гнойно-воспалительные заболевания новорожденных и детей грудного возраста (омфалит, пиодермия, конъюнктивит, гастроэнтероколит, сепсис);Генерализованные септические заболевания. Для профилактики — обработка послеоперационных и свежеинфицированных ран, а также для профилактики внутрибольничных инфекций по эпидемическим показаниям.Противопоказания: Гиперчувствительность.Дозирование. Внутрь. Энтероколит, заболевания внутренних органов, дисбактериоз кишечника — 3 раза в день за 1 ч до еды. На 1 прием до 6 мес. — 5мл, 6–12 мес. — 10 мл, от 1 года до 3 лет — 15 мл, от 3 до 8 лет — 20 мл, от 8 лет и старше — 30 мл.Ректально 1 раз в день (в виде клизмы) в сочетании с двукратным приемом внутрь. На 1 прием до 6 мес. — 10 мл; 6–12 мес. — 20 мл; от 1 года до 3 лет — 30 мл; от 3 до 8 лет — 40 мл; от 8 лет и старше в клизме — 50 мл.Местно в течение 7–20 дней при терапии гнойно-воспалительных заболеваний с локализованными поражениями.В случае обработки полости гнойного очага химическими антисептиками перед применением бактериофага полость промыть стерильным 0,9% раствором NaCl.Гнойные раны — в виде орошения, аппликаций, повязок, введение через дренаж не менее 1 раза в день. При абсцессах после вскрытия и удаления гнойного содержимого препарат вводят в количестве меньшем, чем объем удаленного гноя. В дренированные полости ежедневно 1 раз в день — 20–200 мл.Остеомиелит — 10–20 мл в полость раны через турунду, дренаж.Введение в полости (плевральная, суставная и др. ограниченные полости) — до 100 мл бактериофага, оставляя капиллярный дренаж, через который в течение нескольких дней бактериофаг вводится повторно.Гнойно-воспалительные гинекологические заболевания — 5–10 мл ежедневно 1 раз в день в полость вагины, матки.Гнойно-воспалительные заболевания ЛОР-органов — 2–10 мл 1–3 раза в день в полости среднего уха, носа. Бактериофаг используют для полоскания, промывания, закапывания, введения смоченных турунд (оставляя их на 1ч).Цистит, пиелонефрит, уретрит — 20–50 мл в мочевой пузырь и 5–7 мл в почечную лоханку через цистостому или нефростому.Детям до 6 мес. Сепсис, энтероколит новорожденных, включая недоношенных детей, 2–3 раза в сутки в виде высоких клизм (через газоотводную трубку или катетер). При отсутствии рвоты и срыгивания препарат применяют внутрь, смешивая с грудным молоком. Возможно сочетание ректального и перорального применения препарата. Курс лечения — 5–15 дней, при рецидивирующем течении заболевания возможно проведение повторных курсов лечения. Для профилактики сепсиса и энтероколита при внутриутробном инфицировании или опасности возникновения внутрибольничной инфекции у новорожденных детей бактериофаг применяется в виде клизм 2 раза в день в течение 5–7 дней.Омфалит, пиодермия, инфицированные раны — 2 раза в день ежедневно в виде аппликации (марлевую салфетку смочить бактериофагом и наложить на пупочную ранку или пораженный участок кожи).Побочное действие. Не описаны.Особые указания. Применение бактериофага не исключает применение др. ЛС, в том числе антибактериальных и противовоспалительных препаратов.Важным условием эффективной фаготерапии является предварительное определение фагочувствительности возбудителя.Таблица 4. Торговые названия c действующим веществом Бактериофаг стафилококковыйТорговые названияЛекарственные формыПроизводительIV, ‰Цены в аптекахвсевсевсеБактериофаг стафилококковыйраствор для приема внутрь, местного и наружного примененияМикроген НПО АО (НПО «Биомед») (Россия)0.002от 566 р.Бактериофаг стафилококковыйраствор для приема внутрь, местного и наружного примененияМикроген НПО АО (ИмБио — Нижегородское предприятие по производству бакпрепаратов) (Россия)0.002от 566 р2.2 Технология создания стафилококкового бактериофагаИзобретение относится к биотехнологии, в частности к производству медико-биологических препаратов. Цель - повышение выхода бактериофага и его литической активности. Стафилококковые бактерии культивируют в мясопептонном бульоне Мартена при постоянном перемешивании и аэрации до концентрации бактерий 1 - 1,7 млрд./мл. Заражение бактерий производят при множественности инфекции 1 фаговая частица на 6 - 7 бактериальных клеток, культивирование ведут в течение 3 - 3,5 ч до максимального просветления фаголизата. Стерилизующую фильтрацию проводят на пористых мембранах. Литическая активность 107,61-0,19 (по Аппельману), т.е. 90%.Изобретение относится к биотехнологии, в частности к производству медико-биологических препаратов. Цель изобретения повышение выхода бактериофага и его литической активности. П р и м е р: Размножение стафилококкового бактериофага проводят в реакторе со смонтированной системой перемешивания и аэрации. Культивирование проводят в мясопептонной питательной среде Мартена с добавлением глюкозы до конечной концентрации 0,4% рН 7,3-7,5. Для размножения стафилофага используют 6-9 производственных штаммов стафилококков. В качестве посевной используют 18-часовые бульонные или 18-часовые агаровые культуры, из которых готовят нативную смесь и засевают в питательную среду до концентрации 2-3107 клеток/мл.Культивирование бактерий проводят при постоянном перемешивании со скоростью 150-200 об/мин и аэрации 1,5-2 л воздуха на 1 л среды. В процессе культивирования стафилококков периодически определяют концентрацию микробных клеток по калибровочному графику оптической плотности стафилококков на ФЭКе 56М со светофильтром N 6. График строят с использованием оптического стандарта мутности. После 2,5-3-часового культивирования в экспоненциальной фазе роста, когда оптическая плотность культуральной суспензии достигает 0,6-0,9 ед., что соответствует 1-1,7 млрд./мл по графику, в реактор вносят бактериофаг из расчета 1 инфекционная фаговая частица на 6-7 бактериальных клеток с учетом данных их одиночного цикла развития фага. Латентный внутриклеточный период размножения фага 45-50 мин. Через 3-4 генерации фага, длящейся 3-3,5 ч, наступает видимый лизис бактериальных клеток, сопровождающийся просветлением культуральной среды приблизительно до оптической плотности 0,06 ед. Затем фаголизат фильтруют через стерилизирующие фильтры непосредственно из реактора. Полученный отфильтрованный фаголизат характеризуется высокими литическими свойствами, лизируя 96% титровочных культур в разведении фага 107-108 (по Аппельману). В таблице даны сравнительные результаты выхода бактериофагов трех опытов по известному способу и трех опытов по предлагаемому. Предлагаемый способ обладает высокой производительностью, технологичен. Получаемый целевой продукт (в количестве 30-40 л) имеет высокую литическую активность (107,6 0,19), разница в литической активности составляет 15,6 раза.Формула изобретения (представлена на рис. 4). СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СТАФИЛОКОККОВОГО БАКТЕРИОФАГА путем выращивания стафилококков в условиях аэрации и перемешивания в жидкой питательной среде с последующим заражением бактериофагом, инкубацией посевов и стерилизующей фильтрацией целевого продукта, отличающийся тем, что, с целью повышения выхода бактериофага и его литической активности, выращивание стафилококков проводят в течение 2,5 3 ч, заражение бактериофагом осуществляют при достижении концентрации бактерий 1 1,7 млрд./мл из расчета 1 фаговая частица на 6 7 бактериальных клеток и инкубирование проводят в течение 3 3,5 ч, а стерилизующую фильтрацию проводят на микропористых мембранах.Рис. 4. Формула изобретения стафилококкового бактериофагаЗаключениеПрепараты бактериофагов эффективны при лечении болезней, вызванных антибиотикоустойчивыми штаммами микроорганизмов, в частности при лечении паратонзиллярных гнойников, воспалений пазух носа, а также гнойно-септических инфекций, реанимационных больных, хирургических заболеваний, циститов, пиелонефритов, холе циститов, гастроэнтероколитов, дисбактериоза кишечника, воспалительных заболеваний и сепсиса новорожденных. При обширно распространенном формировании стабильности к антибиотикам у патогенных бактерий необходимость в новых антибиотиках и альтернативных технологиях контроля за микробными инфекциями завоевывает все большую значимость. Бактериофагам, вероятно, еще предстоит исполнить свою роль в лечении инфекционных заболеваний как при их независимом применении, так и в сочетании с антибиотикотерапией.Обладая широким спектром антибактериальной активности и клинической эффективности, бактериофаги эффективны против лекарственноустойчивых организмов, что предоставляет возможность расценивать их как аналоги или заменители антибиотиков и средства противосептической терапии.Фаготерапия может использоваться профилактически с целью борьбы с распространением инфекционного заболевания там, где источник идентифицирован на ранней стадии, или там, где вспышки случаются внутри сравнительно закрытых организаций, таких как школы или детские сады.Активность лечебно-профилактических бактериофагов при инфекционных болезнях пищеварительной системы, гнойно-септических заболеваниях кожных покровов, кровеносной системы, дыхательной системы, опорно-двигательного аппарата, мочеполовой системы. Также это касается штаммов больничного происхождения, характеризующихся множественной устойчивостью к антибиотикам. Список использованной литературыАнтибиотики-убийцы: [история открытия, польза и вред, противопоказания, ищем замену, когда нет выхода]. М.: Эксмо, 2007. Алсынбаев, М. М., Медведев, Ю. А., Туйгунов, М. М. Биопрепараты и ведущие направления их лечебно-профилактического применения: монография. – Уфа: РИО филиала «Иммунопрепарат» ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ, 2008. – 100 с. Бактериофаги – антибактериальные препараты будущего: сб. статей. – М., 2009. – 66 с. «Бактериофаги: Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности» / Материалы международной научно-практической конференции.– Ульяновск:, ГСХА им. П.А. Столыпина, 2013, т. II – 182 с. Бактериофаги – вирусы бактерий: учеб. пособие / авт.- Б19 сост. Н. В. Иконникова. – Минск: ИВЦ Минфина, 2017. – 41 c.Боргоякова, М. Б., Ильичев, А. А. Практикум по молекулярной вирусологии «Бактериофаги»: учеб.-метод. пособие / Новосиб. гос. ун-т. Новосибирск, 2013. – 34 с. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: М: ООО «Медицинское информационное агентство», 2002. – 736 с. Воробьев А.А. Медицинская и санитарная микробиология: учеб. пособие для студ. высш. мед. учеб. заведений / А.А. Воробьев, Ю.С. Кривошеин, В.П. Широбоков. – 2-е изд., стер. – М.: Издательский центр “Академия”, 2006. – 464 с. Дарбеева, О. С., Майская, Л. М., Перепанова, Т. С. Опыт использования адаптированных препаратов бактериофагов // Биопрепараты. – 2002. – № 1. – С. 13–17. Дроздова, О. М., Брусина, Е. Б. Применение бактериофагов в эпидемиологической практике: взгляд через столетие // Эпидемиология и инфекционные болезни. – 2010. – № 5. – С. 20–24. Зинченко, А. И., Паруль, Д. А. Основы молекулярной биологии вирусов и антивирусной терапии. – Минск: Вышэйшая школа, 2005. – 214 с.Коротяев А.И., Бабичев С.А. Медицинская микробиология, иммунология и вирусология: Учебник для мед. вузов. – 3-е изд., испр. и доп. – СПб.: МпецЛит, 2002. – 591 с.: ил. Каттер, Э. Бактериофаги. Биология и практическое применение / под ред. Э. Каттер, А. Сулакулидзе // М: «Научный мир». – 2012. – 640 с. Литусов Н.В. Бактериофаги. Иллюстрированное учебное пособие. – Екатеринбург: Изд-во УГМА, 2012. - 38 с.Материалы международной научно-практической конференции «Бактериофаги: Теоретические и практические аспекты применения в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности» / – Ульяновск: ГСХА им. П.А. Столыпина, 2013. – т. II – 182 с. Медицинская микробиология, вирусология и иммунология: Учебник для студентов медицинских вузов / Под ред. А.А. Воробьева. – 2-е изд., испр. и доп. – М.: ООО «Медицинское информационное агентство», 2006. – 704 с.; ил., табл. Препараты бактериофагов: краткий обзор современного состояния и перспектив развития / И. В. Красильников, К. А. Лыско, Е. В. Отрашевская.Щербенков И. М. Бактериофаги. Что мы знаем о них? // МС. 2013. №2-3. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/bakteriofagi-chto-my-znaem-o-nih (дата обращения: 21.10.2021).